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光譜流式加油站
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如何讀懂光譜指紋3

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如何讀懂光譜指紋

光譜指紋(Spectral Signature),就是指利用光譜流式細胞儀偵測螢光物質後所得到的「連續性波段的螢光強度圖譜」集合而成的獨特圖譜。

這些圖譜會因為儀器所搭載的雷射數目不同而有不同的光譜指紋(Spectral Signature),因為在不同雷射所激發後得到的「連續性波段的螢光強度圖譜」長相都不一樣,所以光譜指紋(Spectral Signature)的複雜度將隨著雷射數增加而變高,但同時也代表在不同螢光物質間有更好的分辨率。

下圖就舉BB700這個常用的染劑,在3雷射系統 與 5雷射系統的光譜指紋(Spectral Signature)的差異為何

在上圖中,經過比較後,可以很明顯發現,5雷射系統的光譜指紋,多了由UV光與YG(Yellow-Green)光所激發的連續性波段的螢光強度圖譜,因此在複雜度上,明顯比3雷射系統還要高,但也提供更佳的分辨率。

而這樣的圖譜究竟是如何產生?其中又有什麼資訊藏在其中呢?

在每一個雷射的光譜圖譜中,可以看出來都是利用多個密度方格所建構出來的,而這些方格的訊號其實都是透過CYTEK的獨家專利技術之多通道粗波復用(CWDM)技術,將不同波長之螢光訊號展開來被高靈敏度之雪崩光電二極體全陣列偵測模組(APD arrays)所接受後的訊號
所以當我們在看某一個螢光物質的光譜指紋(Spectral Signature)時,我們可以發現在某個雷射波段中,會出現螢光強度最強的密度方格,代表此雷射為該螢光物質的主要激發雷射,而該密度方格的波段位置則代表該螢光物質的主要散射光波長,而此波段也稱為Peak emission。
然而有些螢光物質並非單一雷射激發,而是會出現Cross-excitation 的現象,所以除了 Peak emission之外,還會出現Sencondary peak emission,因此透過這些光譜指紋(Spectral Signature),我們即可區分不同種類的螢光物質的major excited Laser 以及 Major emission wave length. 


撰文者: 禾豐醫產品經理 林宗成 Vincent
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